大蒜素体外抗白念珠菌生物膜作用的实验研究

目的 探讨大蒜素在体外对于白色念珠菌生物膜作用的抗击作用.方法 通过用4-2 048μg/ml二倍倍比稀释的大蒜素或0. 125-1 024μg/ml二倍倍比稀释的氟康唑处理白色念珠菌48 h, 24 h或8 h后, 采用XTT法检测大蒜素对白色念珠菌的杀伤作用, 以及大蒜素造成生物膜80％抑制浓度 (SMIC80) 的测定, 采用FUNI免疫荧光染色的方式测定大蒜素对白色念珠菌形成的生物膜厚度的影响, 采用q PCR检测大蒜素对白色念珠菌中与生物膜形成相关的基因表达水平.结果 大蒜素对于所有白色念珠菌的MIC在32-128μg/ml, SMIC80为64-256μg/ml, 均小于对应到氟康唑的作用值.大蒜素对于白色念珠菌标准株SC5314的生物膜形成呈现剂量依赖的抑制效果, 当大蒜素浓度为4μg/ml时对生物膜形成的抑制作用不明显, 随着剂量的升高开始表现出抑制作用, 而当大蒜素浓度升为128μg/ml时, 对生物膜形成的抑制作用达到80％, 显著高于对照组 (大蒜素浓度为0) (P ＜0. 001);当大蒜素的浓度为16μg/ml及以下时, 对于菌株的抑制作用不明显 (P＞ 0. 05), 而当大蒜素的浓度升高到128μg/ml时, 对菌株的抑制作用表现明显 (P ＜0. 01), 并且在第4小时时lg CFU降为4.通过对染色后的荧光强度进行量化来显示生物膜的厚度, 可以发现, 荧光强度随着大蒜素的浓度升高而不断降低, 在大蒜素浓度为128μg/ml时, 荧光强度值接近于0.对生物膜形成相关基因表达情况进行q PCR测定, 发现经过大蒜素128μg/ml处理8 h后, 相比不处理, 生物膜相关基因ALS1表达下调了4. 7％, SUN41下调了18. 7％, MP65下调了68. 3％, HWP1下调了77. 4％, GSH下调了38. 4％.结论 大蒜素对于白色念珠菌具有抑制作用, 并对其表面生物膜的形成具有良好的抵抗作用, 效果显著, 值得临床参考.