脂联素对高糖环境下视网膜血管内皮细胞自噬的影响

目的 研究脂联素(adiponectin,APN)对高糖培养环境下恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(monkey choroid-retinal endothelial cell line,RF/6A)自噬水平的影响. 方法 将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组(正常培养基培养)、高糖组(含25 mmol/LD-葡萄糖的培养基培养)和高糖+APN组(含25 mmol/LD-葡萄糖+15 μg/ml APN的培养基培养).分别采用电镜观察细胞内自噬体的形成,Western blot法检测细胞自噬标志蛋白LC3及Beclin-1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬荧光. 结果 三组细胞中均可见到自噬体的形成,高糖组明显多于对照组,高糖+ APN组又少于高糖组;三组细胞均有LC3和Beclin-1的蛋白表达,高糖组两种蛋白的表达明显高于对照组(P＜0.05),高糖+APN组明显低于高糖组(P＜0.05);三组细胞中均可观察到自噬流,对照组可见较弱的绿色和红色荧光,高糖组黄色和红色荧光明显增多,高糖+APN组黄色和红色较高糖组荧光明显降低. 结论 高糖环境激活RF/6A细胞自噬,APN可以降低高糖环境下的细胞自噬水平,提示APN对病理刺激条件下的细胞自噬具有调控作用.