LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响

目的 观察LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响.方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,构建LOX-1小干扰RNA(LOX-1-siRNA),并用LOX-1-siRNA 0.5μg、1μg、1.5μg与脂质体转染剂(μl)比例为1:1,1:2,1:3转染RAW264.7细胞48 h,经荧光显微镜观察不同转染条件下的转染效率,并分别使用反转录-多聚酶反应(RT-PCR)和Western blot的方法检测各组LOX-1的mRNA和蛋白表达水平并选取最佳转染比例.随机将RAW264.7细胞分成4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+LOX-1-siRNA组和pGenesil组;分别使用反转录-多聚酶反应(RT-PCR)和Western blot的方法检测各组MMP-9的mRNA和蛋白表达水平.结果 ①LOX-1-siRNA1及LOX-1-siRNA2分别转染RAW264.7细胞48 h,LOX-1-siRNA2抑制作用强于LOX-1-siRNA1.②用LOX-1-siRNA与脂质体转染剂不同比例转染RAW264.7细胞48 h后,当LOX-1-siRNA量为1.0μg、Lipofectamine2000的量为2μl时转染效率最高,与其余任一组相比差异有统计学意义(P<0.05).③与对照组比较,ox-LDL组MMP9 mRNA表达水平明显升高;ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9 mRNA表达明显减弱;pGenesil组MMP-9 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义.④与对照组相比,ox-LDL组MMP9蛋白表达明显增加;ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9蛋白表达明显减弱;pGenesil组MMP-9蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义.结论 ox-LDL可促进小鼠巨噬细胞MMP9的表达;抑制小鼠巨噬细胞LOX-1的表达后,ox-LDL促进MMP9的表达相应减弱.由此可见ox-LDL可通过LOX-1受体促进MMP-9表达.