硫化氢通过TLR4/NF-κB通路改善MPP+所致SH-SY5Y细胞炎症性损伤
Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong(2020)
Abstract
目的 观察硫化氢(H2S)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)所致SH-SY5Y细胞损伤的改善作用,并探讨其可能的机制.方法 以500μmol/L的MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型,以硫氢化钠(NaHS)为外源性H2S供体.实验细胞分为3组:对照组、MPP+组、NaHS+MPP+组.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;TUNEL法检测细胞凋亡;Griess试剂盒检测细胞培养液中的NO水平;ELISA法检测SH-SY5Y细胞培养上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平;Western blot法检测iNOS、TLR4、IκBα及NF-κB的蛋白水平.评价H2S对该帕金森病细胞模型的影响.结果 ①500μmol/L的MPP+可以导致SH-SY5Y细胞的存活率下降,凋亡率增加,经NaHS预处理可以使SH-SY5Y细胞的存活率增加,凋亡率降低;②MPP+处理导致SH-SY5Y细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、NO等炎症因子释放增加;NaHS预处理可以减轻此炎症损伤;③MPP+处理组SH-SY5Y细胞TLR4增高,下游蛋白IκBα和NF-κB磷酸化水平增高,NaHS可明显抑制MPP+所致TLR4/NF-κB通路的活化,减少NF-κB p65磷酸化,减少iNOS表达.结论 H2S可通过抑制TLR4/NF-κB通路的激活,减少炎症因子的产生,减轻MPP+所致SH-SY5Y细胞的炎症损伤.
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