体外矿化体系中磷灰石结合肽介导的钙磷微粒自组装

目的 在体外矿化体系中探讨磷灰石结合肽NH2-CLPLWYPSC-COOH(CLP)和NH2-CYENLRSTC-COOH (CYE)介导的钙磷微粒的自组装.方法 固相法合成环状肽CYE和CLP.构建碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AP)控释的溶液仿生矿化体系,将添加剂CYE、CLP和牛血清白蛋白(BSA)以100 μg/mL浓度预溶于体系中,以不含添加剂的体系为阴性对照.监测体系90 min内每5 min A820 nm值的变化情况.扫描电子显微镜(scanning electron microscopy, SEM)和透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)观察沉积物形貌及组装模式.结果 BSA促进矿化反应的发生,CLP和CYE则表现为对矿化的抑制.环状肽(特别是CYE)作用于矿化前体并使其形成特殊的片层状结构.陈化28 h和96 h后,CLP和CYE组中的片状钙磷微晶组装形成多孔的纳米颗粒,而阴性对照和BSA组中的矿化球则长至微米级.TEM和选区电子衍射(selected area electron diffraction,SAED)结果证实,添加剂可诱导不同的微晶自组装模式,并延迟非晶相向磷灰石相的转变.结论 磷灰石结合肽CLP、CYE抑制磷酸钙成核,延迟晶体变相,其中CYE可诱导片状微晶自组装成特殊的纳米螺旋管状结构.