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重组草酸降解酶乳酸菌治疗高草酸尿症的实验研究

Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong(2017)

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摘要
目的 构建表达重组草酸降解酶的乳酸菌,并探讨对高草酸尿症大鼠的治疗作用.方法 将草酸脱羧酶(ox-alate decarboxylase,ODC)和草酸氧化酶(oxalate oxidase,OxO)基因与表达质粒pMG36e重组,通过电转化将重组质粒转入乳酸菌MG1363中.在含100 mmol/L草酸的培养液中培养48 h,测量其生长情况及培养液中草酸含量变化.以含5%草酸食物喂养SD大鼠,并同时进行重组乳酸菌灌胃治疗,1周后收集大鼠24 h尿液测量草酸含量.结果 成功构建重组pMG36e-ODC,pMG36e-OxO乳酸菌,两者都可在含100 mmol/L草酸的培养液中生长,20 h左右开始进入对数期,40 h左右进入稳定期.其中pMG36e-ODC乳酸菌可明显降低培养液内草酸浓度,48 h内可降解30%,而培养pMG36e-OxO乳酸菌和正常乳酸菌后培养液中草酸含量无明显变化,48 h内草酸含量水平下降了约15%.pMG36e-ODC乳酸菌喂养可显著降低高草酸饮食大鼠尿液中草酸含量.结论 重组ODC乳酸菌可有效降解草酸,并可通过降解食物中草酸缓解模型大鼠高草酸尿症.
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关键词
oxalate decarboxylase,oxalate oxidase,lactic acid bacteria,gene recombination,calcium oxalate stones
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