硫化氢活化ERK抵抗内质网应激诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨硫化氢(H2S)对心肌的保护作用是否通过激活细胞外信号调节激酶(ERK)通路来抵抗心肌缺血诱导的内质网应激所致的心肌细胞凋亡.方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、ISO模型组、NaHS+ ISO组及PD98059阻断组,每组各15只.对照组大鼠注射等体积生理盐水;ISO模型组大鼠第1、2天腹腔注射生理盐水,第3、4天注射完生理盐水30 min后背部皮下分别注射10 mg/kg和5 mg/kg的ISO;NaHS+ ISO组大鼠腹腔注射NaHS 14μmol/kg,1次/d,连续2d后,改为2次/d,连续2d,并在后2d的第1次注射30 min后,于背部皮下分别注射10 mg/kg和5mg/kg的ISO,1次/d;PD98059阻断组大鼠在上述NaHS+ ISO组大鼠处理基础上,于注射ISO之前经尾静脉注射MEK/ERK抑制剂PD98059(4 mg/kg),1次/d,连续2d.每组最后一次注射ISO并禁食12 h后,检测心电图、心功能指标;测定血浆中H2S浓度变化;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学方法检测心肌中GRP78、CHOP及ERK磷酸化(p-ERK)蛋白的表达.结果 ISO模型组大鼠血浆的H2S含量明显低于对照组(P＜0.01);14 μmol/kg NaHS可以显著改善心肌缺血引起的心功能改变,而PD98059阻断组可以逆转NaHS的心肌保护作用;与ISO模型组相比,NaHS+ ISO组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达明显减少(均P＜0.05),p-ERK表达明显增多(P＜0.01),AI、心肌梗死面积明显减小(均P＜0.05);与NaHS+ ISO组相比,PD98059阻断组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达、AI、梗死面积均显著增加(均P＜0.05),心功能明显降低(P＜0.05),而p-ERK无表达.相关分析显示大鼠心肌细胞CHOP表达、AI与p-ERK的表达呈负相关(P＜0.01).结论 内源性H2S浓度的降低及内质网应激可能参与急性缺血心肌损伤的发生与发展,H2S对缺血损伤的心肌保护作用机制可能与其激活ERK进而抑制内质网应激诱导的心肌细胞凋亡有关.