HSP70在不同应激程度CUMS昆明小鼠胚胎中的表达及作用
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition)(2017)
摘要
目的 建立雌性昆明小鼠慢性轻度不可预见性应激(CUMS)动物模型,探讨在心理应激状态下,热休克蛋白70(HSP70)是否参与机体对胚胎的应激保护作用.方法 将300只雌性昆明小鼠以9种应激因子在28 d内随机应用造模,并分为轻度、中度和重度应激3组.对照组(50只)不造模.通过孕马血清促性腺激素/人绒毛膜促性腺激素促排卵,观察卵巢反应及胚胎发育潜能;采用免疫荧光染色及实时荧光定量PCR检测HSP70在2-细胞胚胎及孕4 d(D4)胚胎中的表达.结果 28 d CUMS刺激后,实验组小鼠轻度应激占50%(150只),中度应激占32%(96只),重度应激占18%(54只).促排卵后,轻度应激组小鼠2-细胞胚胎数、D4胚胎数和优胚率等与对照组比较差异均无统计学意义,而中、重度应激组小鼠较对照降低(P<0.05).免疫荧光染色和实时荧光定量PCR显示HSP70在轻、中度应激组小鼠2-细胞胚胎和D4胚胎中的表达高于对照组(P<0.05),而重度应激组较对照组差异无统计学意义.结论 CUMS刺激后HSP70的表达升高,可能与其应激保护作用有关.
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关键词
Heat shock protein 70,Chronic unpredictable mild stress,Mouse embryos,Immunofluorescence
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