CLARITY技术在小鼠急性肾损伤模型中的应用

目的 基于小鼠急性肾损伤模型探讨CLARITY技术在病理诊断中应用的价值.方法 将24只昆明小鼠随机均分为实验组和对照组,每组(各12只)分别建立左侧输尿管完全梗阻模型,0 d、2 d、4 d、6 d后每次取3只实验组小鼠进行透明化处理,对照组行常规HE染色.联合应用肉眼观察法、激光共聚焦显微镜观察法和常规显微镜观察法检测肾脏组织的形态学改变.采用TissueFAXSTM Cytometry组织细胞定量分析系统对共聚焦显微镜二维图片中的肾小管上皮细胞数量和肾小管管腔面积进行定量分析.结果 肉眼观梗阻侧肾脏,随着时间延长,肾体积增大、充血、水肿,肾盂和输尿管扩张,肾实质结构逐渐萎缩,肾盏融合,肾皮质开始变薄;实验组和对照组均观察到肾脏梗阻后肾小管上皮细胞扁平化、扩张,随着梗阻时间延长,逐渐出现肾小管萎缩消失、组织结构破坏,典型形态消失,纤维结缔组织增生,肾脏出现纤维化;实验组采用激光共聚焦显微镜扫描发现同一个组织的不同层面肾小管上皮细胞数量和肾小管管腔面积分布明显不同.结论 透明化技术可观察急性肾损伤后肾脏不同组织层面的病理改变,比HE染色的二维层面提供更多的信息,在病理学和形态学研究领域有较高的应用价值.