miR-505对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及相关机制研究

目的:探讨miR-505对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及相关机制.方法:采用q-PCR测定人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中的miR-505水平.分别设置miR-505 mimics组与阴性对照(miR-NC)组,采用LipofectamineTM 2000将miR-505 mimics及miR-NC转染至MG63细胞中,比较2组细胞增殖速率及侵袭细胞数,进一步采用Western blot及q-PCR考察转染miR-505的MG63细胞中MMP-9、CDK4、Cyclin-D1、HMGB-1及β-联蛋白(β-catenin)、磷酸糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的蛋白及mRNA水平.结果:骨肉瘤细胞MG63中miR-505水平为0.57±0.06,明显低于人成骨细胞hFOB1.19的1.03±0.12(P＜0.01).转染miR-505后,miR-505 mimics组的表达量为3.59±0.37,明显高于miR-NC组的1.09±0.12(P＜0.01).miR-505 mimics组转染48 h和72 h后的OD450mm值分别为0.84±0.09和1.29±0.13,均明显低于miR-NC组(P＜0.05).miR-505mimics组侵袭细胞数为(42.84±4.35)个,明显低于miR-NC组的(66.84±6.85)个(P＜0.05).miR-505 mimics组MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1蛋白水平均低于miR-NC组(P＜0.05).miR-505 mimics组MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1 mRNA水平均低于miR-NC组(P＜0.05).同时,miR-505 mimics组Wnt信号通路中关键靶点β-catenin和GSK-3β蛋白与基因表达均明显低于miR-NC组(P＜0.05).结论:miR-505可通过抑制Wnt信号通路,下调MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1表达,从而抑制骨肉瘤细胞的增殖与侵袭.