TCDD宫内暴露致雄性子代大鼠生殖毒性研究

目的:探讨2-3-7-8四氯二苯并二噁英(2-3-7-8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin,TCDD)富内暴露对雄性子代生殖毒性的影响及机制.方法:成功交配后,将母鼠随机分组.高剂量组(0.5 μg/kg)、低剂量组(0.1 μg/kg)和溶剂对照组,每组各6只,TCDD组及对照组于孕8～14 d(gestation day 8-14,GD8-14)采用灌胃方式分别给予TCDD及玉米油处理.孕鼠自然分娩,测量雄性仔鼠肛门至生殖器的距离(anal to genital distance,AGD);计算睾丸的脏器系数;利用精子质量分析仪对仔鼠精子的质量及数量进行分析测定;酶联免疫吸附法对雄性子代血清睾酮(testosterone,T)水平进行测定;测定凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、Caspase-3的表达水平.结果:0.1 μg/kg组、0.5 μg/kg组仔鼠与对照组仔鼠相比,AGD[(1.49±0.04) cm、(1.32±0.01)cm和(1.21±0.02) cm]有所缩短(P=0.000),精子数目[(72.33±4.46)×106个/mL、(63.67±3.44)×106个/mL、(45.33±5.47)×106个/mL]与精子活率[(78.53±1.26)％、(64.40±3.14)％、(53.87±3.65)％]明显降低,精子畸形率[(2.17±0.75)％、(4.83±0.75)％、(8.00±1.10)％]升高(-0.000),血清中T水平[(2.68±0.06) ng/mL、(2.38±0.08) ng/mL和(2.10±0.09) ng/mL]明显下降(-0.000),差异均有统计学意义,0.5 μg/kg TCDD组雄性仔鼠的睾丸质量(P=0.001)和睾丸脏器系数(P=0.004)降低的差异有统计学意义;睾丸组织细胞Bax蛋白相对表达量(0.836±0.004、1.185±0.004、1.414±0.001)随染毒剂量的递增而上升(P=0.000),Bcl-2(1.368±0.053、1.108±0.040、0.751±0.022)则相反(P=0.001),同时,0.5 μg/kg TCDD染毒组Pro-Caspase-3蛋白表达明显降低,但Cleaved-Caspase-3蛋白表达明显增加(P=0.000).结论:宫内暴露TCDD可使雄性仔鼠出现雌性化特征,影响雄性仔鼠生育能力,对雄性子代具有生殖毒性,其机制可能与仔鼠睾丸组织细胞增殖-凋亡失衡和细胞凋亡的线粒体通路被激活有关.