代综方对3T3-L1脂肪细胞分化及相关基因表达的影响

目的:研究代综方(Dai Zong Fang,DZF)对3T3-L1脂肪细胞分化及分化过程中相关基因表达的影响.方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,鸡尾酒式诱导脂肪细胞分化,给予不同浓度DZF干预6d.BODIPY493/503与DAPI双荧光染色观察脂肪细胞分化情况;甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法测定细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量;RT-PCR检测CCAAT增强子结合蛋白-α(CCAAT enhancer binding protein-α,C/EBP-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated re-ceptor-γ,PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)的mRNA表达;Western blot法检测PPAR-γ、C/EBP-α的蛋白表达.结果:DZF抑制脂肪细胞分化,降低细胞内TG含量,并呈剂量依赖效应;与对照组比较,DZF大剂量组明显下调ACC的mRNA表达(P＜0.05),DZF小中大剂量均明显下调FAS的mRNA表达(P＜0.01);与对照组比较,DZF中、大剂量组明显下调C/EBPα、PPAR-γ的mRNA表达(P＜0.01),Western蛋白表达结果与mRNA结果一致.结论:DZF能够明显抑制3T3-L1脂肪细胞的分化程度,其机制可能与下调C/EBPα、PPAR-γ、ACC、FAS基因的表达有关.