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应用肽核酸反向杂交技术检测HBV阿德福韦耐药突变株

Chongqing Yike Daxue xuebao(2014)

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摘要
目的:建立一种肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)反向杂交技术,用于检测乙肝病毒阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)常见耐药突变位点.方法:利用反向杂交技术,设计出特异性的PNA探针,与PCR扩增后带有生物素标记的样本进行杂交;通过对探针浓度,杂交温度和时间等条件的优化建立起最佳反应条件.应用该技术检测了临床ADV治疗慢性乙肝患者的72例血清样本,与测序法比较了其检测的准确性.结果:(1)通过共价结合能够将PNA探针固定在尼龙膜上,特异性检测ADV常见耐药突变位点.(2)与直接测序法相比,PNA反向杂交技术检测准确性为97.88%.结论:通过优化杂交反应,建立起快速、灵敏的检测乙肝病毒ADV常见耐药突变位点的PNA反向杂交技术.
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关键词
peptide nucleic acid,reverse hybridization,hepatitis B virus,adefovir dipivoxil
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