鬼臼毒素衍生物SQW－76诱导人骨肉瘤细胞凋亡及其机制

目的：研究鬼臼毒素衍生物SQW－76对人骨肉瘤U－2 OS细胞的抗肿瘤活性并探讨其机制。方法：噻唑蓝（methylthiazolyldiphenyl －tetrazolium bromide，MTT）法检测SQW－76及阳性对照药物依托泊苷（VP－16）和阿霉素（adria-mycin，ADM）对U－2 OS细胞和成纤维细胞体外增殖的抑制作用及对U－2 OS细胞生长曲线的影响；异硫氰酸荧光素－碘化丙啶（fluorescein isothiocyanate －propidium iodide，FITC－PI）双染行流式细胞术测细胞凋亡；聚合酶链式反应（poly-merase chain reaction， PCR）检测SQW－76对 U－2 OS细胞凋亡相关基因表达的影响；caspase总抑制剂及caspase－3抑制剂对SQW－76诱导U－2 OS细胞凋亡的影响；JC－10线粒体膜电位检测法测SQW－76对U－2 OS细胞凋亡线粒体通路的影响；检测Caspase－3蛋白活性。结果：SQW－76在体外对U－2 OS细胞抑制作用明显，IC50值为（6．18±0．3）μmol／L，流式细胞术检测SQW－76通过凋亡途径抑制细胞，PCR发现给药后Caspase－3、caspase－9 mRNA表达水平上调，加入Caspase总抑制剂可明显抑制细胞凋亡，加入Caspase－3抑制剂可轻微抑制细胞凋亡，给药后线粒体膜电位降低，Caspase－3蛋白活性增高。结论：SQW－76在体外试验抗骨肉瘤细胞作用明显且体细胞毒性低于阳性药物VP－16、ADM，其可能通过影响caspase－9、caspase－3相关基因诱导线粒体凋亡通路诱导U－2 OS细胞凋亡。