地塞米松对内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化的抑制作用
Medical Journal of Wuhan University(2016)
Abstract
目的:探讨地塞米松(dex)抑制内毒素诱导的大鼠正常肾小管上皮细胞(NRK-52E)上皮-间质转化的作用和机制.方法:按照不同的处理方式分为:对照组(Control),内毒素组(LPS 5 mg/L),地塞米松小剂量组(LPS 5mg/L+dex 0.5 mg/L),地塞米松中剂量组(LPS 5 mg/L+dex 5 mg/L)和地塞米松大剂量组(LPS 5 mg/L+dex50 mg/L).处理24 h后,取各组培养基200μl,1 500 g、15 min离心后去沉淀,分析IL-1和TNF-α的分泌量.通过细胞免疫荧光检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维黏连蛋白(Fibronectin).Western blotting检测核转录因子(NF-κB-p65),磷酸化Smad3(p-Smad3),核因子转录抑制蛋白α(IκB-α)的表达.结果:ELISA结果显示,内毒素组IL-1,TNF-α分泌较对照组明显增多,加入地塞米松后分泌逐渐减少,大剂量效果尤为显著.细胞免疫荧光结果显示,内毒素组较对照组E-cadherin的表达减少,α-SMA和Fibronectin表达增多,加入地塞米松后能够阻止这种改变,并呈剂量依赖.Western blotting结果显示地塞米松能上调IκB-a表达,并减少NF-κB-p65,p-Smad3的表达.结论:地塞米松可能通过NF-κB/Smad信号通路抑制内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化.
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