脂多糖对中性粒细胞吞噬结核分枝杆菌功能的影响及机制

目的 探讨脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)对人外周血中性粒细胞(neutrophil或polymorphonuclear neutrophil,PMN)吞噬结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)功能的影响及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在其中发挥的作用.方法 取健康成人外周血PMN加入M.tb,抗酸染色、显微镜观察PMN吞噬M.tb情况;PMN与异硫氰酸荧光素(FITC)标记M.tb孵育5～20 min,流式细胞仪检测PMN吞噬率;不同浓度LPS作用PMN,流式细胞术检测PMN吞噬率;应用TLR4单克隆抗体后,流式细胞术检测LPS作用PMN的吞噬率变化.结果 PMN与M.tb作用,经抗酸染色,显微镜油镜观察到中性粒细胞内吞噬有大量粉红色索状M.tb.利用FITC标记M.tb,流式细胞术检测M.tb的标记率在95％.PMN与FITC标记M.tb 37℃水浴作用,利用流式细胞仪检测PMN吞噬率随孵育时间延长而增加.LPS预处理人PMN后,发现PMN 5 min吞噬百分率随LPS浓度增加而增高(P<0.05).TLR4单克隆抗体作用PMN,再与LPS作用后,PMN吞噬率较未加TLR4单克隆抗体作用有所降低(P<0.05).结论 LPS可通过TLR4增强PMN吞噬结核分枝杆菌功能.