丹酚酸A对脂多糖诱导人肺微血管内皮细胞线粒体自噬和细胞损伤的影响
Journal of Wenzhou Medical University(2018)
Abstract
目的:探讨丹酚酸A(Sal A)对脂多糖(LPS)诱导的人肺微血管内皮细胞(HPMVECs)线粒体自噬和细胞损伤的影响.方法:采用终浓度为10 μg/mL LPS构建细胞损伤模型,并将实验分为对照组、Sal A组、LPS组、LPS+Sal A组.采用噻唑蓝染色法分析细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞内活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位水平,蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)-II/I、Beclin1、PTEN介导的假定激酶蛋白1(PINK1)和Parkin蛋白相对表达量.结果:10 μg/mL LPS呈时间依赖性抑制HPMVECs的增殖;LPS+Sal A组细胞相对存活率高于LPS组,低于对照组(P<0.05).LPS组ROS含量(283.96%±10.88%)增高,膜电位水平(38.25%±5.69%)降低,与对照组(100%)相比差异有统计学意义(P<0.05);LPS+Sal A组ROS含量(138.76%±11.82%)低于LPS组,线粒体膜电位水平(76.56%±6.22%)高于LPS组(P<0.05).LPS组细胞LC3-II/I、Beclin1、PINK1和Parkin蛋白表达量较对照组增高(P<0.05),LPS+Sal A组LC3-II/I、Beclin1、PINK1和Parkin蛋白相对表达量低于LPS组(P<0.05);LPS组线粒体PINK1和Parkin蛋白表达量与对照组比较增高(P<0.05),LPS+Sal A组明显低于LPS组(P<0.05).结论:Sal A减轻LPS诱导的HPMVECs细胞细胞损伤作用,其可能机制与其降低细胞内ROS,稳定线粒体膜电位,抑制线粒体自噬有关.
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