miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制

Journal of Wenzhou Medical University(2017)

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Abstract
目的:探讨miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制.方法:培养人正常成骨细胞系hFOB 1.19和人骨肉瘤细胞系U2OS,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)比较2组细胞miR-21的表达差异.通过miR-21-up慢病毒感染U2OS细胞,qRT-PCR检测感染前后U2OS细胞中miR-21的表达变化.Transwell侵袭实验检测miR-21对U2OS细胞侵袭的影响,并通过Western blot检测验证在U2OS细胞中miR-21对于靶基因PTEN是否具有调控作用及miR-21对U2OS细胞中侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响.结果:qRT-PCR结果表明miR-21在骨肉瘤细胞系U2OS中高表达(P<0.05).Transwell检测结果表明上调miR-21的表达能够明显促进U2OS细胞的侵袭(P<0.05).Western blot检测表明PTEN在骨肉瘤细胞中低表达,且与miR-21表达呈负相关(P<0.05).miR-21可促进侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05).结论:miR-21可通过抑制PTEN蛋白的表达,进而促进侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达,促进人骨肉瘤细胞系U2OS的侵袭.
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