全肺去细胞生物支架的制备与鉴定

目的：通过聚乙二醇辛基苯基醚（TritonX-100）、十二烷基磺酸钠（SDS）灌注法制备大鼠全肺去细胞生物支架，并对其进行鉴定。方法：20只SD大鼠随机数字表法分成去细胞组与正常对照组，每组10只，分别取心、肺联合体，去细胞组经右心室置入留置针至肺主动脉，恒温37℃依次灌注肝素化PBS溶液、1%TirtonX-100、0.8%SDS及去离子水。进行DNA定量分析，HE染色及免疫荧光观察残留细胞及细胞核成分，丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂（ABS）铸型观察肺内血管分布情况。结果：去细胞组DNA含量为（40.37±5.01） ng/mg，较正常对照组的（846.64±65.70）ng/mg下降95%以上；HE染色及免疫荧光染色见去细胞组肺生物支架保留了大量细胞外基质，未见明显细胞及细胞核成分残留；血管铸型标本显示去细胞组血管分布与正常对照组相仿，其分支完整、清晰。结论：TritonX-100、SDS灌注法可有效清除肺内细胞成分，较好地保留细胞外基质（ECM）和血管网络结构，是一种简便且较为理想的制备组织工程肺生物支架方法。