糖化白蛋白酶法测定试剂研制与评价

目的：研发糖化白蛋白（GA）酶法测定试剂并进行方法学评价。方法：利用特异性的蛋白酶（PR）在3 min内裂解GA并释放出糖化氨基酸，然后利用酮胺氧化酶进行氧化并释放出过氧化氢，过氧化氢经Trinder’s反应显色后，与同样处理的标准溶液比较求得GA含量。结果：该试剂批内、批间不精密度（CV）分别为0.84%～1.88%和1.14%～2.35%；线性范围为1.3～1200μmol/L，血清样本2～16倍稀释范围与原倍血清的百分偏差在99.3%～108.6%之间，平均回收率为101.8%；血清中胆红素＜35 mg/dL，甘油三酯（TG）＜750 mg/dL，血红蛋白＜200 mg/dL，胆汁酸＜8 mg/dL，尿酸＜33 mg/dL，葡萄糖＜1800 mg·dL-1，维生素C 15 mg/dL，EDTA·K22.5 mg/dL，肝素钠80 U/L，枸橼酸钠8.0 mg/dL，对550μmol/L GA的检测干扰＜±5%。与日本ASAHI公司提供的GA测定试剂方法进行比较，回归方程及相关系数分别为Y=0.9991X+0.0809，r=0.9958；试剂置4℃开盖储存至少稳定30 d，置4℃加盖储存至少稳定12个月。结论：GA酶法测定试剂精密度良好，线性范围宽，稀释准确性满足临床需要，回收率较高，抗干扰能力较强，与进口试剂相关性好，具有推广应用价值。