体外两种方式培养的肠神经干细胞生物学特性比较

目的：对纤维连接蛋白（FN）包被和未包被两种方式培养的肠神经干细胞进行生物学特性比较，探索肠神经干细胞体外扩增合适的培养方式。方法：从孕15 d SD胎鼠肠管分离出肠神经干细胞，用FN包被和不包被两种方式原代培养第5天的神经球，通过形态学、免疫荧光细胞化学及流式细胞仪检测对其生长状态、增殖及分化能力进行比较。结果：与包被组相比，未包被组的原代培养第5天的神经球呈半贴壁生长，球体形态较规则，球体中央开始变黑，神经球周边未形成大量放射状的神经丝；荧光镜下发现2组原代神经球的Nestin、BrdU都显阳性；包被组的球体周围放射状神经丝Tuj-1显阳性。流式细胞仪检测结果显示，与包被组的（12.67±2.16）%相比，未包被组的Nestin阳性细胞百分比显著增高，为（20.69±2.15）%（P＜0.05）；与包被组的（12.69±1.13）%相比，未包被组的BrdU标记的增殖细胞百分比显著增加，为（35.82±2.11）%（P＜0.05）；与包被组的（21.77±2.53）%相比，未包被组的Tuj-1阳性细胞百分比显著减少，为（10.67±1.14）%（P＜0.05）。结论：未包被FN的体外培养加快了形成神经球的时间，且形态较规则，能较好地维持干细胞自我增殖，减少分化，适宜作为肠神经干细胞体外增殖培养方式。