PITX2启动子甲基化及其与膀胱癌临床病理的关系

目的:由于近些年表观遗传学的发展,基因启动子甲基化检测在预测癌症诊断预后方面拥有巨大的潜力.PITX2启动子的高CpG岛增加其甲基化程度,其能够成为新的膀胱癌预测因子.方法:QRT-PCR检测永生化膀胱上皮细胞系(SV-HUC)和3种膀胱癌细胞系(EJ、5637、T24)以及癌组织和癌旁组织的差异性表达.通过DNA甲基化测定实验对33例全膀胱切除术切除癌组织进行甲基化程度测定,分为大于50％甲基化,小于50％甲基化建立甲基化程度与肿瘤分期分级的联系.结果:使用实时定量RT-PCR(Q-PCR)证明PITX2在膀胱癌细胞中高表达.癌组织中甲基化程度明显高于癌旁组织.PITX2启动子甲基化与肿瘤大小(P =0.026 7)、高级别(P =0.027 7)和TNM分期(0.016 0)显着相关.在预测肿瘤侵袭(T2-T4肿瘤)中,PITX2启动子甲基化的ROC曲线下面积(AUC)为0.867.Kaplan-Meier生存分析表明,与低PITX2甲基化表达的肿瘤相比,高PITX2启动子甲基化表达的肿瘤与较短的总体存活相关.结论:PITX2在膀胱癌组织中异常高表达,并且PITX2启动子区域在癌组织中存在高甲基化是患者不良预后的独立危险因素,因此,PITX2启动子甲基化可能成为膀胱癌肿瘤发生进展有效的预测因子.