流式细胞术和微球技术分析应激细胞内HSP70表达

目的 建立检测细胞内HSP70的流式细胞分析技术,并应用其分析炎症、化疗药物(紫杉醇)和物理因素(热处理)对U937细胞、A549细胞和Hela细胞HSP70表达的影响.方法 培养U937、A549和Hela细胞,分别用细菌脂多糖(LPS)、紫杉醇(PTX)和热应激(42 ℃)上述细胞;采用流式细胞术检测细胞内活性氧、细胞周期和细胞凋亡;分别采用传统的免疫印迹技术和自制液相微球结合流式细胞术来分析HSP70的表达水平.结果 LPS诱导U937细胞后,其细胞内活性氧(ROS)增加并发生凋亡,PTX处理A549细胞后,细胞发生G2/M期阻滞和凋亡,热处理导致Hela细胞发生凋亡.采用自制液相微球结合流式细胞术以及传统的免疫印迹技术,均可发现细胞内HSP70随处理因素强度或时间延长而表达增加.结论 所建立的自制液相微球结合流式细胞术可用于细胞内蛋白表达量的分析.