BMP-2对ECV304细胞内皮-间质转化功能的影响

目的 研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对ECV304细胞内皮-间质转化(EndMT)的影响,并探讨其可能的机制.方法 构建慢病毒载体并转染肝癌HepG2细胞,Real-Time PCR与Western blot检测转染效率,转染后的HepG2细胞与ECV304细胞共培养.实验分为上调组(BMP-2表达水平上调的HepG2细胞)、正常组(BMP-2表达水平正常的HepG2细胞)、下调组(BMP-2表达水平下调的HepG2细胞)、Normal组(与正常组HepG2细胞共培养的ECV304细胞)、LV组(LV组,与下调组HepG2细胞共培养的ECV304细胞)和Overexpression-LV-BMP-2组(OE组,与上调组HepG2细胞共培养的ECV304细胞).Western blot分析EndMT标志物(CD31、VE-Cadherin、FSP-1和a-SMA)的表达水平,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路后观察EndMT标志物的表达水平.结果 Real-Time PCR与Western blot结果显示,与正常组比较,下调组BMP-2 mRNA与蛋白的表达水平降低(P＜0.05),上调组HepG2细胞BMP-2 mRNA与蛋白的表达水平增加(P＜0.05);与Normal组比较,OE组ECV304细胞内皮相关蛋白(VE-Cadherin、CD31)表达降低及间质相关蛋白(FSP-1、a-SMA)表达增加,LV组ECV304细胞内皮相关蛋白(VE-Cadherin、CD31)表达增加及间质相关蛋白(FSP-1、a-SMA)表达降低(P＜0.05);给予PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂LY294002后,VE-Cadherin、CD31表达增加,FSP-1、a-SMA表达降低.结论 BMP-2通过PI3K/AKT/mTOR信号通路促进ECV304细胞的EndMT.