慢病毒介导稳定表达 miR-183的人卵巢癌 skov3细胞系

目的：建立稳定表达 miR-183的人卵巢癌 skov3细胞系。方法将 Pre-miR-183、has-miR-183 inhibitor基因克隆到真核表达载体 pEZX-MR03、pEZX-AM03中，构建成重组表达载体 pEZX-MR03-183 mimics、pEZX-AM03-183 inhibitor，再将重组表达载体转染至293T 细胞中包装慢病毒。用包装好的慢病毒感染人卵巢癌 skov3细胞，经嘌呤霉素、潮霉素 B 筛选后获得稳转细胞系，最后用 RT-PCR 法检测 miR-183在转录水平的表达。结果分离培养出稳定高表达和低表达 mirR-183的单克隆细胞株。结论实验成功建立了稳定表达 miR-183的 skov3细胞系，为研究 miR-183的生物学功能提供了有效的细胞模型。