ADAM10抑制剂GI254023X对CCRF-CEM和Molt4细胞增殖与凋亡的作用及机制研究

目的 本研究旨在探讨解聚素金属基质蛋白酶10(ADAM10)抑制剂GI254023X对急性T淋巴细胞白血病CCRF-CEM及Molt4细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 选择不同浓度的GI254023X处理CCRF-CEM及Molt4细胞,CCK-8法检测并绘制增殖抑制曲线,Annexin V/7-AAD双标记法分析细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot检测切割后的Notch1蛋白(Cleaved Notch1),定量PCR检测抑凋亡基因Bcl-2、c-Myc、Mcl-1,促凋亡基因BAD、BAK及Notch1靶基因Hes-1的转录变化.结果 GI254023X能明显抑制CCRF-CEM及Molt4细胞增殖,且抑制效应呈一定的时间和剂量依赖性(CCRF-CEM细胞24、48 h的相关系数r分别为0.981、0.962,Molt4细胞24、48 h的相关系数r分别为0.992、0.957),CCRF-CEM细胞24、48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(29.40±3.28)μmol/L和(11.14±2.21)μmol/L;Molt4细胞24、48 h的IC50分别为(19.04±1.58)μmol/L和(11.25±2.31)μmol/L;GI254023X能够诱导CCRF-CEM及Molt4细胞凋亡,使细胞阻滞于G0/G1期;Western blot检测结果显示,Cleaved Notch1在GI254023X作用后水平下降;GI254023X能够使抑凋亡基因Bcl-2、c-Myc、Mcl-1和Hes-1表达减低,促凋亡基因BAD、BAK表达升高.结论 GI254023X能抑制CCRF-CEM及Molt4细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制Notch1活化有关.