利用SPR生物传感器实时监测干细胞促血管新生旁分泌因素的变化

目的 探讨用表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)技术生物传感器实时定量和定性监测干细胞分化中旁分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的时相性变化及灵敏度.方法 通过样品与SPR传感器芯片表面修饰的VEGF单抗特异性识别引起金膜表面折射率变化,进而导致SPR角的变化,实现实时监测体外促骨髓间充质干细胞定向分化内皮细胞体系中VEGF的变化.结果 SPR传感器可以监测MSC旁分泌的微量VEGF,在分化培养第5天明显增高,第6天达到峰值,检测下限可达2 nmoL/L.结合速率常数为4.68×105/ms,解离速率常数为1.73×10-4/s,解离速率平衡常数为3.71×10-10 mol/L.结论 SPR传感器能定性、定量检测干细胞在定向分化过程的旁分泌细胞因子,与传统方法相比,SPR技术具有较高的灵敏度、准确性且操作简便.