缺血后处理心肌细胞线粒体比较蛋白质组学的研究

目的 以大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,利用蛋白质组学对纯化的大鼠心肌细胞线粒体进行分析和鉴定,探讨缺血后处理大鼠心肌细胞线粒体蛋白表达的变化.方法 24只大鼠随机分为正常组(Normal,Nor)、缺血再灌注损伤组(Control,Con)、缺血后处理组(ischemic postconditioning,IPO)、5-羟葵酸拮抗缺血后处理组(5-hydroxydecanoate,5-HD+IPO),利用Langendorff灌注装置构建各组大鼠离体心脏模型.以Nycodenz密度梯度离心法分离大鼠心肌线粒体,通过Western blot方法检测其纯度,提取各组线粒体蛋白,进行2D-DIGE分离,分析差异表达蛋白,进行MALDI-TOF-MS鉴定.结果 与Nor组比较,Con组NADH脱氢酶亚基(NDUFA10)表达水平降低3.84倍;IPO和Con组比较:NDUFA10和琥珀酸脱氢酶-黄素蛋白(SDHA)的蛋白表达水平分别减少3.33倍和1.68倍.与IPO组比较,5-HD+ IPO组的SDHA表达水平升高1.65倍.结论 心肌缺血再灌注损伤降低了NDUFA10蛋白的活性,可能在缺血后处理线粒体NADH呼吸链稳定的维持过程中发挥作用,SDHA蛋白和线粒体敏感性K+通道(mitoKATP)可能同时在缺血后处理内源性保护机制中具有作用.