人表皮生长因子基因重组腺病毒穿梭质粒的构建和鉴定

目的：：构建含人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)基因的重组腺病毒穿梭质粒，为制备表达EGF基因的重组腺病毒奠定基础。方法：查找GenBank中hEGF的基因序列，通过化学方法进行全基因合成得到信号肽+hEGF基因片段，将sp-hEGF基因装载到pUC57质粒，双酶切后与经过同样处理的腺病毒穿梭质粒pYr-ads-6相连，即构建成pYr-ads-6-hEGF质粒，行双酶切及测序鉴定。结果：sp-hEGF成功插入腺病毒穿梭质粒pYr-ads-6中，测序鉴定与GenBank中的序列一致。结论：hEGF重组穿梭质粒构建成功。