过表达Mxi1对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的:构建含有Max结合蛋白1(Mxi1)基因的重组慢病毒载体,并探讨过表达Mxi1基因对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法:利用DNA重组技术将Mxi1基因克隆至慢病毒载体,经酶切和测序鉴定后,将重组质粒与慢病毒辅助包装元件质粒共转染293T细胞,获得含Mxi1基因的重组慢病毒.重组慢病毒感染人胃癌SGC-7901细胞,荧光显微镜下观察感染效率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Mxi1、cyclinB1和caspase-8的基因表达,免疫印迹法(Western blot)检测Mxi1蛋白的表达.CCK-8比色法和流式细胞术分别检测Mxi1基因对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.结果:成功构建含Mxi1基因的慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot检测到Mxi1基因和蛋白的表达.RT-PCR结果显示,过表达Mxi1的SGC-7901细胞与空白对照细胞及过表达空病毒对照细胞相比,细胞内cycminB1的mRNA表达水平明显降低,而caspase-8的mRNA表达水平显著升高.CCK-8实验和流式细胞术检测结果显示,过表达Mxi1的SGC-7901细胞与空白对照细胞及过表达空病毒对照细胞相比,细胞增殖活性明显降低,细胞凋亡率显著升高.结论;成功构建Mxi1慢病毒载体且有效转染SGC-7901细胞,过表达Mxi1可以抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡.