抑制NF-κB活性对TNF-α联合IFN-γ诱导肾小管上皮细胞表达趋化因子的影响

目的:探讨抑制核转录因子-κB (nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)活性对肿瘤坏死因子(tumor necrosisfactor,TNF)-α联合干扰素(intefferon,IFN)-γ诱导肾小管上皮细胞表达趋化因子的影响,及过氧化小体增殖剂激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptor-gamma,PPAR-)激动剂15-脱氧-△(12,14)-前列腺素J2(15-deoxy-△ 12,14-prostaglandinJ2,15d-PGJ2)抑制趋化因子表达的机制.方法:将肾小管上皮细胞HK-2分为空白组、TNF-α联合IFN-γ刺激组(刺激组)、NF-κB的特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithioearbamate,PDTC)干预组及15d-PGJ2干预组.实时荧光定量PCR检测各组趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11 mRNA的相对表达量;ELISA检测各组上清液中趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的蛋白分泌量;Western blot检测空白组、刺激组及15d-PGJ2 干预组中NF-κB信号通路相关蛋白p65、IκBα及其磷酸化蛋白p-p65、p-IκBα的表达量.结果:TNF-α联合IFN-y刺激HK-2细胞后,CXCL9、CXCL10、CXCL1 1 mRNA表达量及蛋白分泌量显著增高(p＜0.05);而经PDTC预处理后,趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA相对表达量分别下降了85.44％、45.94％、45.03％(P＜0.05),蛋白分泌量分别下降了60.87％、47.59％及53.42％(P＜ 0.05);15d-PGJ2预处理后,CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA相对表达量分别下降了93.87％、92.40％、86.81％(P＜ 0.01),蛋白分泌量分别下降了49.74％、67.13％、62.39％(p＜0.01),且Western blot结果显示HK-2细胞中p65及IκBα蛋白的磷酸化水平与刺激组相比明显降低(P＜ 0.01).结论:抑制NF-κB活性使HK-2细胞分泌趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL1 l减少;15d-PGJ2通过抑制NF-κB信号通路的活化,下调趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的表达.