细粒棘球绦虫肌动蛋白基因的克隆表达
Chinese high altitude medicine and biology(2020)
Abstract
目的 克隆表达细粒棘球绦虫肌动蛋白(EgACT)基因,并获得EgACT纯化蛋白.方法 将经全序列合成、密码子优化合成的目的基因EgACT克隆入PET28a-SUMO表达载体中、转化入Rosetta(DE3)中,诱导表达采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),经镍琼脂糖凝胶亲和层析法获得纯化蛋白.结果 重组质粒PET28a-SUMO-EgACT构建成功.SDS-PAGE结果显示,目的蛋白在Rosetta(DE3)中获得高效表达,相对分子量约为60 kDa.结论 完成细粒棘球绦虫肌动蛋白基因的克隆及其在Rosetta(DE3)中的表达,并获得纯化蛋白.
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