聚合酶链反应技术检测阴道毛滴虫的研究

目的:建立PCR检测阴道毛滴虫的方法.方法:按照滴虫TV-E650-1基因设计一对引物,采用PCR技术扩增滴虫目的基因,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据扩增及电泳结果判断PCR法体外诊断阴道毛滴虫感染的可行性.同时,通过与其它常见阴道微生物PCR结果对比,判断所设计引物的特异性;根据模板DNA的稀释倍数判断引物的敏感性.结果:设计的一对引物以滴虫DNA为模板,扩增出大小为438 bp的基因片断,与目的基因相符;空白对照扩增阴性.以乳酸杆菌、大肠杆菌、阴道加德纳菌等阴道常见微生物DNA为模板,扩增结果均为阴性.将滴虫DNA稀释至1 000倍(相当于1.36 pg/μL)仍可见明显扩增.结论:PCR检测滴虫方法可行,且准确,特异性好,敏感性高,能用于临床批量检测,可作为体外诊断阴道毛滴虫感染及流行病学调查的候选方法.