LncRNA GAS5吸附miR-221-3p抑制肝细胞肝癌增殖及其启动子甲基化状态
Journal of Nantong University(Medical Sciences)(2020)
摘要
目的:研究长链非编码RNA-生长抑制特异性基因5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,同时研究其启动子区域的甲基化状态.方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测GAS5在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达,在肝癌细胞中过表达GAS5,CCK-8法检测细胞增殖,直线划痕法检测细胞迁移,Transwell小室法检测细胞侵袭.通过双荧光素酶法检测GAS5与miR-221-3p的靶向结合.通过不同剂量甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)的加入了解GAS5启动子区域的甲基化状态.结果:GAS5在肝癌细胞株和肝癌组织中表达显著下调.过表达GAS5明显抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及克隆形成.GAS5存在与miR-221-3p的互补结合位点.随着5-Aza-dC浓度的增加,GAS5相对表达量呈现显著上调.结论:GAS5在肝癌组织和细胞系中的表达显著下调,可能与其CpG岛甲基化有关.GAS5可作为分子海绵吸附miR-221-3p抑制肝癌细胞增殖.
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