牛膝多肽活性成分对大鼠短暂性脑缺血的保护作用

目的:研究牛膝多肽(Achyranthes Bidentata polypeptides,ABPP)活性成分(active component k isolated from ABPP,ABPPk)对大鼠短暂性脑缺血的保护作用.方法:体外建立原代胎鼠皮层神经元氧糖剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型,复氧复糖同时分别加入不同质量浓度ABPPk(0.04,0.2,1.0 μg/mL)和ABPP(1.0 μg/mL,阳性对照)处理皮层神经元,72 h后通过MTT法检测ABPPk对OGD损伤神经元活力的影响:通过Western Blot分析ABPPk对OGD损伤凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3表达的影响.体内建立大鼠短暂性大脑中动脉栓塞(transient middle cerebral artery occlusion,t-MCAO)模型,缺血2h后再灌注同时经尾静脉注射给予1.0 mg/kg ABPPk,1次/d,连续3d.于再灌注72 h行神经行为学评分,评价ABPPk对t-MCAO大鼠神经行为缺陷的影响;再灌注72 h断头取脑,行2,3, 5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色评价ABPPk对t-MCAO大鼠脑梗死体积的影响;再灌注72 h采用末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)介导的dUTP生物素缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)试剂盒检测ABPPk对大鼠脑缺血半影区神经元凋亡的影响.结果:ABPPk在体外可有效拮抗OGD引起的皮层神经元凋亡,体内可显著减小脑梗死体积,防止神经元凋亡.结论:ABPPk对大鼠短暂性脑缺血具有神经保护作用,可为开发新型小分子活性肽类神经保护药物提供新的策略.