UPRmt在大鼠深部组织压伤形成中的作用

目的 探讨线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)在大鼠深部组织压伤形成中的作用.方法 将40只雄性SD大鼠用随机数字表法分为正常组和1个受压周期组、3个受压周期组、6个受压周期组、9个受压周期组,每组8只.向大鼠大腿股薄肌部位施加22.47 kPa压力,持续施压2.0 h、放松0.5h为1个受压循环.1个受压周期组模拟压疮处理1个受压循环;3个受压周期组1d内模拟压疮处理3个受压循环;6个受压周期组每天模拟压疮处理3个受压循环,持续2d;9个受压周期组大鼠每天模拟压疮处理3个受压循环,持续3d.造模形成后,处死各组大鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察受压肌肉组织形态学变化;Hoechst 33258染色检测受压肌肉组织中凋亡细胞核数量;蛋白质免疫印迹法检测热休克蛋白60(HSP60)、线粒体特异性蛋白酶(CLPP)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的水平.结果 HE染色显示,与正常组比较,各受压组大鼠局部受压肌肉组织出现肌纤维退变、炎性细胞浸润、空泡变性等病理改变;随着受压周期延长,凋亡细胞核数量增加,Hoechst 33258染色显示细胞核出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光.蛋白质免疫印迹法检测显示,与正常组相比较,1个受压周期组的HSP60、CLPP和CHOP均明显升高(F=13.483～52.801,P＜0.01),而且HSP60、CLPP蛋白表达在1个受压周期组达到高峰,之后减少;CHOP和caspase-3在3个受压周期后增高,9个受压周期组表达最高(F=52.801、42.135,P＜0.01).结论 UPRmt可能参与深部组织压伤的形成.