正交设计对A群脑膜炎球菌兔抗血清制备条件的筛选

①目的 应用正交设计筛选A群脑膜炎球菌灭活疫苗的免疫条件,为A群脑膜炎球菌灭活疫苗的应用提供实验依据.②方法 将灭活A群脑膜炎球菌浓度调整为1×108 CFU/mL、1×109 CFU/mL、1×1010 CFU/mL备用;选择家兔皮内注射、皮下注射、肌肉注射3种方式进行免疫,首次免疫与第二次免疫的时间间隔依次为2、3、4周;根据L9(34)正交设计方案对家兔进行免疫,第二次免疫7天后经家兔颈总动脉采血,分离血清,通过玻片凝集试验和ELISA试验测定兔抗A群脑膜炎球菌血清抗体效价.③结果 A群脑膜炎球菌灭活疫苗免疫家兔后,抗原浓度为1×109 CFU/mL时血清中抗体的几何效价高于其他两组;皮内注射时抗体的凝集效价高于皮下注射和肌肉注射;免疫间隔时间为3周时,抗体的几何效价最高;差异均具有统计学意义(P<0.05).A群脑膜炎球菌荚膜多糖与兔抗血清反应的抗体滴度在106及以上.④ 结论 免疫剂量为 1 × 109 CFU/mL、皮内注射、首次免疫与二次免疫时间间隔为 3 周时,是家兔的最佳免疫条件,为疫苗血清抗体的制备提供了实验依据.