溃疡性结肠炎模型的构建及其炎症反应机制研究

目的:构建2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)以及恶唑酮(oxazolone,OXZ)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型.方法:120只昆明小鼠(♂)随机分为4组(n=30).Ⅰ组、Ⅱ组参照Morris及Walter的方法制备小鼠TNBS模型:Ⅰ组(TNBS溶剂对照组),50％乙醇0.1 mL灌肠;Ⅱ组(TNBS模型组),0.6％ TNBS溶液0.1 mL灌肠;两组灌肠给药一次后在d1、d2、d3、d5、d7每组处死6只.Ⅲ组、Ⅳ组参照Heller方法制备小鼠OXZ模型:Ⅲ组(OXZ溶剂对照组),皮肤涂抹100％乙醇0.1 mL,每天一次,连续2d,d7以50％乙醇0.1 mL灌肠;Ⅳ组(OXZ模型组),皮肤涂抹1％ OXZ溶液(100％乙醇溶解)0.1 mL每天一次,连续2d(致敏),d7以0.5％ OXZ (50％乙醇溶解)0.1 mL灌肠;两组灌肠给药一次后在d 1～d5每天处死6只小鼠.观察Ⅰ～Ⅳ组小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠组织大体损伤指数(colon macroscopic damage index,CMDI)和病理组织学评分(histopathological score,HPS),并检测小鼠结肠组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平.结果:两种模型组小鼠DAI,CMDI和HPS均较对照组有明显改变;TNBS 和OXZ诱导的结肠炎均可导致MPO明显上升,TNBS结肠炎TNF-α明显上升,OXZ结肠炎IL-4明显下降.结论:TNBS及OXZ均能诱导小鼠溃疡性结肠炎模型.两种模型各有特点,其中TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎以辅助性T1 (helper1,Th1)型炎症反应为主,OXZ诱导的小鼠溃疡性结肠炎以辅助性T2 (helper2,Th2)型炎症反应为主.