钙拮抗剂通过非钙通道依赖机制抗缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡

目的:观察钙拮抗剂通过非钙通道依赖途径,减少缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡.方法:用EGTA螯合缺氧液和复氧液中的钙离子,建立无钙液H9c2心肌细胞H/R损伤模型.实验分为对照组(Ctrl)、0钙组(0Ca)、0钙+药物组(0Ca+药物)、模型组(H1/R1)、溶剂组(DMSO)、模型+药物组(H1/R1+药物).Ctrl组用DMEM培养基培养2h,0Ca组用复氧液培养2h,0Ca+药物组在复氧液中加入与H1/R1+药物组相同浓度的药物,培养2h.H1/R1+药物组在缺氧液和复氧液中均加入l×105mol/L的钙拮抗剂,缺氧lh复氧1 h(H1/R1).H/R结束后,通过Western-blot检测Cleaved Caspase-3 (Caspase-3)表达和AnnexinV-FITC/PI检测心肌细胞的早晚期凋亡.结果:Western-blot结果显示,Ver、Nif和F2组能减少无钙液培养的H9e2心肌细胞H/R后Caspase-3的表达.AnnexinV-FITC/PI流式细胞术结果显示,Ver、Nif和F2能减少无钙液培养H9c2心肌细胞H/R后早期和晚期凋亡.结论:Ver、Nif和F2能通过非钙通道依赖途径拮抗H/R诱导的心肌细胞凋亡.