探究PEDF-MSCs对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 观察经玻璃体腔注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响,探讨PEDF联合人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对视网膜神经损伤的保护作用.方法 组织块培养法获取hUCMSCs.流式细胞仪检测表面标志,检测其分化能力.用慢病毒载体以感染复数值为50对其转染.经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合糖尿病饮食诱导糖尿病大鼠模型.实验动物分为4组:正常对照组(N组)、糖尿病注射磷酸盐缓冲液(PBS)实验对照组(A组)、糖尿病注射hUCMSCs治疗组(B组)、糖尿病注射PEDF-MSCs治疗组(C组).造模成功后3个月进行干预治疗,N组不予特殊治疗.玻璃体腔注射PEDF-MSCs 2周后,用荧光显微镜观察PEDF-MSCs在大鼠眼内表达情况.干预治疗2周后用TUNEL法测定并计算各组视网膜神经节细胞凋亡指数AI.结果 玻璃体腔注射后2周,于荧光显微镜下观察到B组及C组大鼠玻璃体腔内呈簇状排列的标记荧光,在视网膜内均未发现明显标记荧光.TUNEL法结果显示,N组各层视网膜无凋亡情况,A组视网膜神经纤维层(NFL)及内丛状层(IPL)层出现大量棕黄色细胞,B组NFL及INL层出现棕黄色细胞较A组减少,C组NFL层有少量棕黄色细胞.结论 PEDF-MSCs可较长时间在糖尿病大鼠玻璃体内存活且持续表达.经玻璃体腔注射PEDF-MSCs能明显改善糖尿病大鼠视网膜神经细胞损伤且效果优于经玻璃体腔注射hUCMSCs.