雌二醇在大鼠脊髓损伤模型中抗自噬作用的研究

目的 探讨自噬在雌二醇干预严重脊髓损伤(SCI)过程中的作用.方法 选取72只SD雌性大鼠,体重为200～ 220 g.采用随机数字表法分为3组,每组24只.其中2组(模型组和干预组)采用动脉夹(15 g闭合力)建立大鼠严重脊髓损伤夹闭模型.干预组在脊髓损伤前1周即开始隔天肌注苯甲酸雌二醇,持续到安乐死之前.为比较高剂量雌二醇的疗效,脊髓损伤后7、14、21、28 d采用BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)评分评估大鼠运动功能.实时荧光定量PCR和蛋白印记检测脊髓损伤后3d自噬标志物表达变化.免疫组化法检测损伤后3 dLC3在运动神经元中的免疫活性.结果 高剂量雌二醇明显改善大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复,损伤后14、21、28 d各时间点对应的BBB评分较模型组高.脊髓损伤术后3d,模型组的LC3、Beclin-1表达高于假手术组,雌二醇干预治疗在mRNA和蛋白水平上抑制其表达.与之相反,自噬底物P62在模型组较假手术组相比有明显降低.然而,给予雌二醇治疗后,P62表达显著增加.免疫组化结果显示脊髓损伤后运动神经元中增强的LC3免疫活性被高剂量雌二醇所抑制.结论 雌二醇在脊髓损伤过程中的神经保护效应在一定程度上与抑制过度自噬相关.