1,25(OH)2D3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察1,25-二羟维生素D3[1,25 (OH)2D3]对人系膜细胞(HMC)增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25 (OH)2D3对HMC增殖调控中的作用.方法 体外培养HMC,取传代培养至第3～7代细胞分为4组:正常对照组(N组)、1,25 (OH)2D3组(10-8 mol/L,VD组)、PI3K抑制剂干预组(LY294002 2 μg/ml,LY组),LY294002(2μg/ml)联合1,25 (OH)2D3组(10-8 mol/L)组(LY+ VD组),干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况.结果 各实验组吸光度值(A值)比较,差异有统计学意义(F=281.641,P＜0.01),其中VD组、LY组和LY+ VD组A值均低于N组,LY+ VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义(P＜0.01).各实验组GJM期比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各实验组G1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);其中VD组、LY组和LY +VD组G1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY+ VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义(P＜0.05).各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-aetin灰度值比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义(P＜0.05);其中VD组、LY组和LY+ VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY+ VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 1,25-(OH)2D3可通过PI3 K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖.