RNA 干扰作用于 HIV -1vpr 基因的筛选实验研究

目的：筛选鉴定针对 HlV -1vpr 基因的小干扰 RNA（siRNA）片段。方法根据 siRNA 设计要求合成siRNA56、siRNA160和 siRNA185寡核苷酸片段，分别转染至含 HIV -1vpr 质粒的 HEK 293T 细胞，并进行总 RNA 提取，采用 Real - time PCR 和 Western blotting 分别从核酸和蛋白水平对 HIV -1vpr 基因表达水平进行验证。结果siRNAs 成功转染含 HIV -1vpr 质粒的 HEK 293T 细胞，降低了 HIV -1vpr 基因的表达水平，其中在 RNA 水平 siRNA160组干扰抑制作用最强，抑制率为89％；在蛋白水平 siRNA56组干扰抑制作用最强，抑制率为96％。结论3个基因片段的 siRNA 均可以下调 HIV -1vpr 的表达水平，但存在差异性，为探索 HIV/ AIDS 基因治疗的可行性和高效性提供了可靠的实验依据。