苦参碱对RANKL诱导破骨细胞分化及TRAF6、c-fos、NFATc1表达水平的影响

目的 探讨苦参碱对RANKL诱导破骨细胞分化的影响及其可能的分子学机制.方法 RAW264.7细胞系培养,根据加入破骨细胞诱导剂RANKL及不同剂量苦参碱,分为空白组、诱导组、苦参碱低剂量组(0.5 mg/mL)、苦参碱中剂量组(1 mg/mL)、苦参碱高剂量组(2 mg/mL).给药后48 h,qPCR、Western blot检测TRAF6、c-fos、NFATc1 mRNA及蛋白的表达,第7天TRAP染色观察多核破骨细胞,第9天qPCR检测Calcr、Ctsk mRNA表达,第12天甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝.结果 不同剂量苦参碱组中多核破骨细胞、骨吸收陷窝、Calcr mRNA、Ctsk mRNA表达量较诱导组减少.苦参碱不同剂量组TRAF6、c-fos、NFATc1 mRNA表达量较诱导组明显下降(P＜0.01),且呈剂量依赖性.空白组与苦参碱高剂量组TRAF6、c-fos、NFATc1 mRNA表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).与诱导组比较,苦参碱低、中、高剂量组TRAF6、c-fos、NFATc1蛋白表达量下降(P＜0.05),且呈剂量依赖性.空白组与苦参碱高剂量组TRAF6、c-fos、NFATc1蛋白表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 苦参碱可能通过抑制TRAF6、c-fos、NFATc1的表达,影响RANKL诱导破骨细胞的分化.