从基质代谢角度探讨扶正化瘀方抗心肌纤维化的细胞分子机制

目的 通过观察扶正化瘀方(FZHY)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)细胞外基质(ECM)代谢的影响,探讨其抗心肌纤维化(MF)的分子机制.方法 差速贴壁法提取乳鼠原代CFs,传代培养.将细胞分为3组,每组6个样本,分别加入2％ FBS-DMEM(空白对照组),1×10-7mol/L Ang Ⅱ(Ang Ⅱ组),1×10-7mol/LAng Ⅱ+100 μg/mL FZHY(FZHY组).干预48 h后,采用ELISA法检测Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Col Ⅲ、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的分泌情况;采用实时荧光定量PCR法检测Col Ⅰ、Col Ⅲ、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达情况.结果 与空白对照组比较,Ang Ⅱ组Col Ⅰ、Col Ⅲ含量及mRNA的表达增加(P＜0.01);与AngⅡ组比较,FZHY组Col Ⅰ、Col Ⅲ含量及其mRNA表达下降(P＜ 0.05或P＜ 0.01).与空白对照组比较,AngⅡ组MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2及其mRNA表达增加(P＜0.05),MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1有降低趋势;与AngⅡ组比较,FZHY组MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2及其mRNA表达下降,MMP-2/TIMP-2降低(P＜ 0.05或P＜ 0.01),MMP-9/TIMP-1有降低趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 FZHY可减少CFs Col Ⅰ、Col Ⅲ的表达,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2及其mRNA表达,降低MMP-2/TIMP-2、MMP-99TIMP-1比值,调控ECM代谢有关.