基于miR21的宫颈癌细胞顺铂敏感性机制研究

目的 探讨miR21影响宫颈癌细胞株Hela及顺铂耐药细胞株Hela/DDP顺铂敏感性的分子机制.方法 利用riboFECTTM CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic及其阴性对照试剂NC转染至Hela细胞,miR21 inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela/DDP细胞,并将细胞分为mimic组、inhibitor组、相应NC组及Blank组.Real-time PCR检测PTEN mRNA的表达水平;流式细胞仪检测细胞周期(PI法)及经顺铂处理后的凋亡率(Annexin V/PI法).结果 Real-time PCR法检测PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,为Hela的(0.410±0.046)倍(P＜0.01);转染mimic后,Hela中PTEN mRNA表达明显低于NC组及Blank组(P＜0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P＞0.05);转染inhibitor后,Hela/DDP中miR21表达明显高于NC组及Blank组(P＜0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Annexin V/PI检测结果显示,mimic组凋亡率与NC组、Blank组比较明显减少(P＜0.05),inhibitor组凋亡率与NC组、Blank组比较显著提高(P＜0.05).PI法检测结果显示,mimic组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显增加(P＜0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P＞0.05);in-hibitor组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显减少(P＜0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,在Hela中高表达.上调miR21在Hela中的表达能明显降低PTEN mRNA的表达,减少凋亡,增加细胞周期中S期所占比例,导致细胞耐药;下调miR21在Hela/DDP中的表达能明显增加PTEN mRNA的表达,增加凋亡率,降低细胞周期中S期所占比例,从而达到增加化疗敏感性的效果.