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miR-298调控Notch1对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响

Medical & Pharmaceutical Journal of Chinese People's Liberation Army(2018)

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摘要
目的 探讨miR-298对骨肉瘤细胞增殖及侵袭的影响及其可能的机制.方法 通过qPCR检测不同骨肉瘤细胞株中miR-298及Notch1的表达差异;利用生物信息学方法预测miR-298的靶基因,并使用荧光光素酶报告基因及免疫蛋白印迹实验对靶基因的表达进行验证;将miR-298 mimics转染至骨肉瘤143B细胞中构建miR-298过表达模型,同时将Notch1 siRNA转染至骨肉瘤143B细胞中构建Notch1低表达模型,通过甲基噻唑基四唑(MTT)实验检测细胞的增殖能力、划痕实验检测细胞的迁移能力、Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力.结果 miR-298在骨肉瘤细胞株呈低表达水平,而Notch1在骨肉瘤细胞中呈过表达状态,增强miR-298的表达,骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著减弱(P<0.05).双荧光素酶报告基因结果显示增强miR-298的表达后,Notch1的表达及活性相应下调,Notch1蛋白表达水平降低(P<0.05).抑制Notch1的表达,骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著减弱(P<0.05).结论 miR-298可负向调控Notch1的表达,抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力.
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