纳米羟基磷灰石通过溶酶体-线粒体通路诱导肾小管上皮细胞的凋亡机制

目的 探索纳米羟基磷灰石(HAP)对肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡的影响及其机制.方法 将不同浓度的(0、5、10、20、40、80μg/mL)的HAP作用于HK-2细胞,使用MTT、活细胞/死细胞染色检测HAP对HK-2细胞增殖的影响.以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2细胞6、24 h,用流式细胞仪检测细胞的凋亡及坏死情况.HAP(40μg/mL)作用于HK-2细胞6 h,用激光共聚焦显微镜观察HAP在细胞内的分布.以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2细胞6 h,用酶标仪检测过氧化氢(H2O2)水平和加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)后HK-2细胞活性的改变,用流式细胞仪检测活性氧(ROS)、线粒体膜电位(Δψm)、caspase-3水平.结果 HAP可明显的抑制HK-2细胞的增殖,且呈浓度-时间依赖性.HAP诱导细胞内ROS升高、线粒体膜电位(Δψm)降低、溶酶体完整性破坏、caspase-3水平增加,从而导致细胞凋亡.结论 HAP通过溶酶体和线粒体途径诱导HK-2细胞凋亡,并呈浓度依赖性.