二乙基亚硝胺对肝脏过表达miR-155转基因小鼠肝癌发生的影响

目的 建立诱发性肝癌模型,观察miR-155转基因小鼠肝癌发生情况及相关基因表达变化.方法 制备Rm155LG转基因小鼠,并行可视化筛选和PCR验证.利用小动物活体成像仪筛选Rm155LG/Cre双转基因小鼠,并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155转基因在Rm155LG/Cre双转基因小鼠肝脏中的表达.分别对Rm155LG/Cre双转基因小鼠和同窝对照小鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN),6个月后取材行肝脏大体形态观察,并通过Western-blot分析肝癌相关基因的表达变化.结果 Luc和miR-155转基因在Rm155LG/Cre双转基因小鼠的肝脏上成功被激活.腹腔注射DEN后,与同窝对照小鼠相比,Rm155LG/Cre双转基因小鼠肝脏癌结节增多,肝癌相关基因表达上调.结论 在Rm155LG/Cre双转基因小鼠上实现了miR-155转基因的肝脏特异激活,并且利用Rm155LG/Cre双转基因小鼠,初步证明了miR-155对DEN诱导的小鼠肝癌的发生有促进作用,这为后续研究miR-155在肝癌发生发展和转移中的作用奠定了坚实的基础.