PM2.5联合中波紫外线处理对HaCaT细胞的影响

目的 研究PM2.5联合中波紫外线(UVB)处理对人皮肤角质形成细胞HaCaT的影响.方法 收集环境中PM2.5并进行其金属成分分析;MTT法测定PM2.5对HaCaT细胞的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为空白对照组(NC组)、单纯IC50浓度的PM2.5处理组(PM2.5组)、单纯30 mJ/cm2的UVB照射组(UVB组)和PM2.5联合UVB处理组(联合处理组),MTT法检测不同处理组对细胞活力的抑制;流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响;Western blot检测不同处理后PARP、LC3的蛋白表达变化.结果 PM2.5样品中金属成分有Ca、Ba、Al、Cu、Pb等;PM2.5对HaCaT细胞的IC50约为300 μg/mL;不同处理组之间,在处理后24 h,对细胞活力的抑制差异显著(P<0.001),其中联合处理组细胞对比NC组活力最低(P<0.001);流式分析结果显示,与NC组比,PM2.5组、UVB组以及联合处理组细胞凋亡率增加(P<0.01),联合处理组凋亡率较PM2.5组增加(P < 0.05),但低于UVB照射组(P < 0.01);Western blot显示PM2.5组、UVB组以及联合处理组LC3-Ⅱ、PARP蛋白较NC组均有增加,联合处理组PARP较UVB组减少,LC3-Ⅱ较PM2.5组、UVB组增加.结论 PM2.5能增加UVB对HaCaT细胞的损伤,其主要可能通过增加细胞自噬,而非凋亡方式.